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              凱氏定氮儀測定蛋白質的化學反應方程式
              發布時間:2021-09-14   點擊次數:43次
                 凱氏定氮儀是根據蛋白質中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量的儀器。因其蛋白質含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法。蛋白質測定常用的方法就是凱氏定氮法,它是通過測定氮含量從而換算成蛋白質的方法,是國際上通用的標準方法,其優點為實驗操作簡單、方便,測量結果的重復性和重現性好,而被廣泛應用于各類食品、谷物、飼料等樣品的蛋白質含量測定中。凱氏定氮法分為常量、半微量、微量法三種方法,其原理是食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解,產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨。堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質的含量。
                一、實驗目的:測得樣品純牛奶中粗蛋白含量
                二、實驗設備及要求:
                1、實驗設備:天平、凱氏定氮儀以及消解儀
                2、實驗要求:測試環境要求潔凈,測試所用試劑與器皿均要求潔凈;
                三、該方法的化學反應方程式為:
                2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4→(NH4)2SO4+CO2↑+SO2↑+16H2O
                此過程的注意事項:
               ?、贅悠废瘯r,對于含糖量很高或含脂量較多的樣品,應注意要緩慢升溫加熱,并隨時注意控制加熱的溫度,避免產生大量泡沫噴出或噴濺到瓶壁上,造成樣品的損失。若因加熱溫度不當,局部溫度過高使消化液噴濺到瓶壁上,應及時轉動凱氏定氮瓶將濺到瓶壁上的樣品消化液沖下,也可在樣品消化前加入少量辛醇或液體石蠟,以減少泡沫的產生。
               ?、谙瘯r應不定時旋轉凱氏定氮瓶,將附在瓶壁上的碳粒沖下,使樣品充分消化。
               ?、廴魳悠冯y以消化至澄清透明的程度,可將凱氏定氮瓶從加熱器上取下,待其中溶液冷卻至室溫后,向消化液中加入少量過氧化氫,再繼續加熱直至完全消化。
               ?、苷麄€消化過程中硫酸的量要充足,以保證樣品中含氮有機化合物的消化。樣品中脂肪含量過高時,要增加硫酸的量,因消化時脂肪消耗硫酸的量較大,使硫酸缺少而影響測定。
               ?、菰跇悠废┢?,即消化液呈藍綠色并澄清透明后,再繼續加熱半小時即可,因此時瓶內消化液溫度過高,若長時間加熱,會使生成的硫酸氫銨分解并釋放出氨氣,使氮的含量損失,從而影響凱氏定氮儀的測定結果。

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